研討會(huì)概述：

流體力顯微鏡( FluidFM )通過將傳統(tǒng)的原子力顯微鏡AFM與微流控技術(shù)相結(jié)合，從而實(shí)現(xiàn)fL級(jí)的液體局部精確調(diào)節(jié)。這項(xiàng)技術(shù)大大拓展了傳統(tǒng)原子力顯微鏡的適用范圍，可廣泛應(yīng)用于基因編輯、單細(xì)胞組學(xué)、單細(xì)胞分選、細(xì)胞生物力學(xué)等領(lǐng)域。

FluidFM技術(shù)研討會(huì)旨在為來自世界各地的研究人員、學(xué)者搭建一個(gè)良好的交流平臺(tái),展示他們借助FluidFM技術(shù)取得的創(chuàng)新性成果，為參會(huì)人員提供更多的啟迪。研討會(huì)將于2023年5月18日-19日在北京大學(xué)舉辦，主要涵蓋議題：?jiǎn)渭?xì)胞基因編輯；活細(xì)胞單細(xì)胞測(cè)序Live-Seq；生物力學(xué)等，歡迎各位老師踴躍參加。

會(huì)議日程：

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特邀報(bào)告：

13:30-14:00 Dr. Simon Egli

Chief Commercial Officer, Cytosurge, Switzerland

Topic: Single-cell biopsies and gene editing with FluidFM technology

14:10-14:40 Dr. Orane Guillame-Gentil

Scientific Collaborator at Laboratory of Systems Biology and Genetics, EPFL, Switzerland

Topic: Temporal transcriptomics through Live-seq

14:50-15:20 Dr. Robert Horvath

Head of Nanobiosensorics Laboratory. Leader of the Nanobiosensorics Group, Research Centre for Energy Research, Institute for Technical Physics and Materials Science, Budapest, Hungary

Topic: FluidFM in the Nanobiosensorics Lab: from large area printing to high-throughput adhesion and injection of single cells

15:30-16:00 Dr. Sinéad Connolly

Postdoc researcher at the Institute for Biomedical Engineering, ETH, Switzerland

Topic: Pick and place of neuronal cells and spheroids using FluidFM for the construction of neuronal networks

16:00-16:20茶歇&獎(jiǎng)品

16:30-17:00馮宇婷 博士

北京大學(xué)工學(xué)院博士

演講題目：FluidFM技術(shù)應(yīng)用于單細(xì)胞粘附力測(cè)定

17:10-17:40 胡西 博士

Quantum Design中國(guó)科學(xué)家

演講題目：FluidFM技術(shù)應(yīng)用新進(jìn)展

FluidFM 技術(shù)應(yīng)用簡(jiǎn)介：

1．活細(xì)胞單細(xì)胞測(cè)序Live-Seq

科學(xué)家借助FluidFM技術(shù)對(duì)現(xiàn)有的scRNA-Seq單細(xì)胞測(cè)序的方法進(jìn)行了優(yōu)化實(shí)現(xiàn)了Live-Seq。為了盡可能的接近Smart-Seq的測(cè)試條件，先將緩沖液吸入探針，然后再進(jìn)行細(xì)胞提取的操作。這樣可以確保所提取的RNA能夠第一時(shí)間與緩沖液混合，從而避免RNA的降解。通過這一方法，科學(xué)家成功實(shí)現(xiàn)了活細(xì)胞單細(xì)胞的測(cè)序，證明了這種方法的可行性。

W. Chen, O. Guillaume-Gentil, P. Y. Rainer, C. G. G?belein, W. Saelens, V. Gardeaux, A. Klaeger, R. Dainese, M. Zachara, T. Zambelli, J. A. Vorholt & B. Deplancke. Live-seq enables temporal transcriptomic recording of single cells. (2022) Nature

Live-Seq是一種十分具有前景的單細(xì)胞測(cè)序的新方法，得益于FluidFM技術(shù)的無(wú)損提取的優(yōu)勢(shì)，Live-Seq技術(shù)除了能夠?qū)崿F(xiàn)傳統(tǒng)測(cè)序的功能外，還降低了細(xì)胞的損傷，而且避免了現(xiàn)有單細(xì)胞測(cè)序手段的細(xì)胞裂解等過程，從而能夠獲得更原生和真實(shí)的測(cè)序信息。這種特點(diǎn)甚至讓單細(xì)胞的基因表達(dá)動(dòng)力學(xué)研究成為可能。相信FluidFM技術(shù)將為單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)帶來更多可能。

2．單細(xì)胞基因編輯CRISPR

著名遺傳學(xué)家George Church，哈佛醫(yī)學(xué)院的遺傳學(xué)教授、Wyss研究所的創(chuàng)始人。CRISPR技術(shù)的發(fā)展一直是他在Wyss研究所的重點(diǎn)，George Church在基因組編輯領(lǐng)域?qū)崿F(xiàn)了多個(gè)關(guān)鍵性突破。

George Church和他的團(tuán)隊(duì)在哈佛醫(yī)學(xué)院Wyss研究所的平臺(tái)和Cytosurge公司之間進(jìn)行合作，將FluidFM技術(shù)應(yīng)用于CRISPR基因編輯。 “Cytosurge的單細(xì)胞顯微操作技術(shù)平臺(tái)，其單細(xì)胞注射和單細(xì)胞分離功能本身不會(huì)傷害細(xì)胞，為我們提供了解決細(xì)胞活力問題的切入點(diǎn)，并可能幫助我們大幅擴(kuò)展基于CRISPR系統(tǒng)的復(fù)合組份基因編輯的潛力。"——George Church博士。

3．神經(jīng)科學(xué)研究

神經(jīng)元之間以及與周圍環(huán)境進(jìn)行交流。在單個(gè)細(xì)胞水平上分析和理解這些相互作用是細(xì)胞神經(jīng)生物學(xué)的關(guān)鍵挑戰(zhàn)。為了回答這些問題，細(xì)胞神經(jīng)生物學(xué)家需要一種工具，使他們能夠以可控的方式創(chuàng)建神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)，并以溫和而非破壞性的方式操縱敏感的神經(jīng)元細(xì)胞。FluidFM技術(shù)通過整合了微流控和原子力顯微鏡的優(yōu)質(zhì)特性，為單神經(jīng)元操作提供了一系列可能性。

除了刺激細(xì)胞外，我們的FluidFM納米注射器已經(jīng)經(jīng)過優(yōu)化，可以有效地將任何可溶性化合物直接注入細(xì)胞溶膠或細(xì)胞核。蛋白質(zhì)、藥物，甚至基因物質(zhì)(如CRISPR-RNPs)都可以被注入細(xì)胞，注入體積可定量，觀察細(xì)胞的反應(yīng)。

與其他苛刻的轉(zhuǎn)染方法相比，F(xiàn)luidFM納米注射器直接進(jìn)入細(xì)胞的溫和力反饋控制的插入不會(huì)影響細(xì)胞的活力。這使得FluidFM特別適合于敏感和難以轉(zhuǎn)染細(xì)胞的基因操作，如神經(jīng)元、干細(xì)胞或原代細(xì)胞。

左圖：使用FluidFM注射編碼GFP的質(zhì)粒24h后表達(dá)GFP的神經(jīng)元(暨南大學(xué)，中國(guó)廣州)

右圖：注射后紅色熒光葡聚糖在C57BL/6 C57小鼠海馬神經(jīng)元中擴(kuò)散(北京大學(xué)，中國(guó)北京)

4．單細(xì)胞力譜測(cè)定

來自北京大學(xué)口腔醫(yī)院的研究團(tuán)隊(duì)采用了多功能單細(xì)胞顯微操作系統(tǒng)——FluidFM技術(shù)，完成了單個(gè)細(xì)胞的分離，單個(gè)細(xì)胞粘附力的測(cè)量。在這項(xiàng)研究中，作者研究了基質(zhì)硬度對(duì)尖*細(xì)胞形成的影響，并探索了基礎(chǔ)機(jī)制。在肝癌細(xì)胞的外層發(fā)現(xiàn)CD31表達(dá)更高，組織硬度也更高。基質(zhì)的硬度增加可以顯著增加血管的生成和尖*細(xì)胞富集基因的表達(dá)。硬度較大的基質(zhì)增加了FAK和p-PXN的局灶黏附，提高了活性Rac1的水平，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞骨架組織和細(xì)胞剛度增加。隨后，YAP作為下游的力效應(yīng)因子被激活并易位入核，上調(diào)靶基因的表達(dá)，最終促進(jìn)尖*細(xì)胞的形成。p-PXN還可以減少細(xì)胞間的連接，從而促進(jìn)尖*細(xì)胞的形成。由此得出結(jié)論：基質(zhì)硬度可通過p-PXN-Rac1-YAP信號(hào)軸調(diào)節(jié)尖*細(xì)胞的形成。

Y. Guo, F. Mei, Y. Huang, S. Ma, Y. Wei, X. Zhang, M. Xu, Y. He, B.C. Heng, L. Chen & X. Deng. Matrix stiffness modulates tip cell formation through the p-PXN-Rac1-YAP signaling axis. (2021) Bioactive Materials.

細(xì)胞力譜測(cè)定在細(xì)胞生命科學(xué)研究中起著至關(guān)重要的作用，然而傳統(tǒng)手段中有著各種各樣的局限性，這主要原因是缺乏一種有效能夠抓取細(xì)胞并進(jìn)行力學(xué)測(cè)定的手段?，F(xiàn)如今FluidFM 技術(shù)在細(xì)胞力譜測(cè)定中的使用，使得研究者們有了一種能夠有效、低損的方式抓取細(xì)胞，并配合著原子力顯微鏡的精確測(cè)量的特性，從而能夠真正意義上的做到精準(zhǔn)、無(wú)損、快速的測(cè)量單細(xì)胞力譜，幫助研究者尋找細(xì)胞力譜與細(xì)胞生命發(fā)展、腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系。

Cytosurge AG簡(jiǎn)介：

瑞士Cytosurge AG成立于2009年，是一家基于FluidFM®技術(shù)生產(chǎn)和銷售的生物技術(shù)公司。Cytosurge推出的多功能單細(xì)胞顯微操作系統(tǒng)——FluidFM OMNIUM，是一款將原子力系統(tǒng)、顯微成像系統(tǒng)、微流控系統(tǒng)、活細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)融為一體的單細(xì)胞顯微操作平臺(tái)。

Quantum Design中國(guó)：

作為瑞士Cytosurge在中國(guó)的代理，Quantum Design中國(guó)公司擁有完善的本地化售前、售中和售后服務(wù)體系。國(guó)內(nèi)本地設(shè)有價(jià)值超過50萬(wàn)美元的備件庫(kù)，用于加速售后服務(wù)響應(yīng)速度；同時(shí)設(shè)有超過300萬(wàn)美元的樣機(jī)實(shí)驗(yàn)室，支持客戶對(duì)設(shè)備進(jìn)行進(jìn)一步體驗(yàn)和深度了解?！安粌H提供先進(jìn)的產(chǎn)品，還提供先進(jìn)的售后服務(wù)"這將是Quantum Design中國(guó)區(qū)別于其他科研儀器供應(yīng)商的重要特征，也正成為越來越多科學(xué)工作者選擇Quantum Design中國(guó)的重要原因。

相關(guān)產(chǎn)品

1、多功能單細(xì)胞顯微操作系統(tǒng)- FluidFM OMNIUM：https://www.chem17.com/st166724/product_36858341.html